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堿性磷酸酶(alkaline phosphatase,簡稱ALP或AKP)為一類磷酸酯酶,廣泛分布于哺乳動物組織內,其活性所需適pH 9.2~9.8。此酶主要存在于物質交換活躍之處(細胞膜),如腸上皮和腎近曲小管的刷狀緣、附睪上皮之靜纖毛、肝的毛細膽管膜以及微動脈和毛細血管動脈部之內皮。此酶還見于內質網、高爾基復合體、吞飲小泡、腸上皮之溶酶體、中性粒細胞之中性顆粒以及平滑肌之細胞膜及吞飲小泡。
現用金屬沉淀法來顯示堿性磷酸酶活性。此法以天然存在的β-甘油磷酸鈉為底物,經酶水解釋放出磷酸,立即被鈣離子沉淀為磷酸鈣,再依次被置換為磷酸鈷和硫化鈷,終產物為黑色硫化鈷沉淀。