非蛋白質巰基含量檢測試劑盒說明書
可見分光光度法
貨號：BC1430
規格：50T/24S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 提取液的配制：將提取液一和提取液二按體積比1：1的比例混合配制，按照樣本數量配制并在當天用完；

2. 試劑二：臨用前加入5 mL無水甲醇充分溶解備用，2-8℃保存八周；

3. 標準品：10 mg半胱*酸，臨用前加入1.65 mL提取液配制成50 µmol/mL的半胱*酸標準溶液備用，2-8℃保存1個月。

產品說明：
生物體內巰基主要包括非蛋白質巰基和蛋白質巰基。巰基化合物在體內具有重要的解毒功能，對生物體的自我調節具有非常重要的生理意義。

巰基基團與5,5’-二硫代-雙-*甲酸（DTNB）反應，生成黃色化合物，在412nm處有最大吸收峰。

技術指標：
低檢出限：0.0007 μmol/mL
線性范圍：0.003125-0.3 μmol/mL
注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計、臺式離心機、恒溫水浴鍋、1mL玻璃比色皿、甲醇、研缽/勻漿器、超聲破碎儀、冰和蒸餾水.

操作步驟：具體操作步驟詳見“產品資料"附件

注意事項：
如果測定吸光值超過線性范圍吸光值，可以增加樣本量或者稀釋樣本后再進行測定。注意同步修改計算公式。
實驗實例：

1. 取0.1g小鼠腎臟加入1mL提取液進行勻漿研磨，取上清后按照測定步驟操作，測得計算ΔA測定=A測定-A對照=0.791-0.033=0.758，帶入標曲y=3.4566x+0.159，得出x=0.1733，按樣本質量計算含量得：

非蛋白質巰基含量（µmol/g質量）= x÷W=0.1733÷0.1=1.733 µmol/g 質量。
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