葡萄糖脫氫酶（GCDH）
活性檢測試劑盒說明書
紫外分光光度法
貨號：BC2690
規格：50T/48S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑二：臨用前加入15 mL試劑一溶解，用不完的試劑2-8℃保存8周；

2. 試劑三：臨用前每瓶加入5 mL試劑一溶解，用不完的試劑建議分裝后-20℃避光可保存4周；

3. 工作液的配制：按照試劑一︰試劑二︰試劑三為4︰3︰2的體積比例充分混勻，現用現配，用前37℃預熱10 min。

產品說明：
GCDH（EC 1.1.1.47）催化D-葡萄糖和NAD(P)生成D-葡萄糖酸和NAD(P)H，主要存在于多種微生物和高等動物的肝臟中。GCDH是一種制備高含量低聚果糖的理想用酶，同時也是臨床血糖測定的診斷用酶，可廣泛用于食品工業及醫藥工業領域中。
GCDH催化D-葡萄糖和NAD生成D-葡萄糖酸和NADH，利用NADH在340nm處吸光值的變化即可反映葡萄糖脫氫酶的活性。
注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
紫外分光光度計、臺式低溫離心機、水浴鍋、1 mL石英比色皿、可調式移液槍、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產品資料"附件
注意事項：

1. 樣本提取上清液置于冰上待測，且樣本提取完成后建議當天提取當天內測完。

2. 當A1或A2大于1時，建議將樣本用提取液稀釋后再進行測定。

3. 當ΔA大于1時，建議將樣本用提取液稀釋后再進行測定。

實驗實例：

1. 取0.1g肝臟加入1mL提取液進行勻漿研磨，取上清后按照測定步驟操作，測得計算ΔA測定管=A2測定-A1測定=0.726-0.682=0.044，ΔA空白管=A2空白-A1空白=0.031-0.031=0，ΔA=ΔA測定管-ΔA空白管=0.044-0=0.044，按樣本質量計算酶活得：GCDH酶活（U/g質量）=1607.7×ΔA÷W =1607.7×0.044÷0.1=707.388U/g 質量。

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