土壤酸性轉化酶（S-AI）活性檢測試劑盒說明書
微量法
注意：本產品試劑有所變動，請注意并嚴格按照該說明書操作。
貨號：BC3075
規格：100T/48S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑二：臨用前取1瓶加入5 mL試劑一充分溶解備用，用不完的試劑2-8℃保存2周；

2. 標準品：10 mg無水*萄糖。臨用前加入1 mL試劑一充分溶解，制備10 mg/mL葡萄糖標準溶液待用2-8℃保存兩周。

產品說明：
S-AI在pH為4.5~5.0（酸性）條件下催化蔗糖不可逆地分解為果糖和葡萄糖，是土壤微生物蔗糖代謝關鍵酶之一。S-AI催化蔗糖降解產生還原糖，進一步與 3,5-二硝基水楊酸反應，生成棕紅色氨基化合物，在540nm有特征光吸收，在一定范圍內540nm光吸收增加速率與S- AI活性成正比。

注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計/酶標儀、恒溫培養箱/水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽、蒸餾水、30-50目篩、冰、甲苯（不允許快遞）。

操作步驟：具體操作步驟詳見“產品資料"附件

注意事項：
1、如果加入試劑三，煮沸10min后有混濁物出現，建議離心除去沉淀（10000rpm，2min），取上清測定吸光度；
2、如果吸光值大于1，可以將上清液再進行稀釋；若吸光值較小，可以減少上清液稀釋倍數。兩種操作均要注意改變公式中的稀釋倍數。
實驗實例：

1. 取兩管0.02g林土，即為測定管和對照管，按照測定步驟操作，記為A測定管、A對照管。用96孔板測得計算ΔA測定=A測定管-A對照管=0.278-0.066=0.212，標準曲線：y=3.6249x-0.1862，x=0.1099，計算酶活得：

S-AI（U/g 土樣）=3.84×x÷W=3.84×0.1099÷0.02=21.1008 U/g 土樣。

1. 取兩管0.02g林土，即為測定管和對照管，按照測定步驟操作，記為A測定管、A對照管。用96孔板測得計算ΔA測定=A測定管-A對照管=0.272-0.066=0.206，標準曲線：y=3.6249x-0.1862，x=0.1082，計算酶活得：

S-AI（U/g 土樣）=3.84×x÷W=3.84×0.1082÷0.02=20.7744 U/g 土樣。
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