研究背景:
小鼠骨髓間充質干細胞的目前干細胞培養難點。小鼠的骨髓基質細胞成分復雜,間充質干細胞比率低,分離培養有一定的難度。陳博士在培養過程中就遇到該問題。他曾成功飼養成人和大鼠骨髓間充質干細胞。但新近培養的小鼠間充質干細胞狀態就很差。按照自己的分析:細胞培養操作沒有問題,培養條件也不錯,試劑來源可靠。問題應該出現在培養基配方上。陳博士以原來的骨髓間充質干細胞培養基為基礎,按照導師的提點,修改了配方,但細胞不好不壞。為此他們做了兩次正交,結果缺總不理想,細胞狀態并不穩定。陳博士為此焦頭爛額,擔心下一步的實驗無法進行。經朋友介紹找到上海科興生物科技的。
解決方案:
上??婆d的干細胞技術專家了解了陳博士的情況,培養技術、取材和試劑來源等,覺得不存在大問題;問題主要的原因是培養基的成分配比。建議陳博士重新配制培養基或使用現成的*培養基。陳博士為了加快實驗進度,直接選用了上??婆d小鼠骨髓間充質干細胞培養基。
選用產品:小鼠間充質干細胞培養基 (Catalog No. BW110014)
實施步驟:
1、 使用上??婆d的小鼠間充質干細胞培養基,進行原代的取材;
2、 同樣時間下,上??婆d的培養基的MSC細胞狀態明顯優于自己配置的培養液;
3、 經過傳代,細胞的狀態和增殖能力都很好;
4、 成功獲得了足夠進行下一步實驗所需的mouse MSC。
結果分析:細胞狀態良好,成梭狀、緊密分布,大小較均勻。目前已經傳20代。對于這次走的彎路,陳博士感慨良多。要的完成課題實驗,就需要轉變觀念,合理利用和整合現有的各個優勢資源,快速達到實驗目標。