草酸銨結晶紫染色液是一種堿性染料,細胞染色時常用的可以把細胞核染成深紫色的染色液。可以和細胞核中的DNA結合,從而將細胞核染成紫色。它在細胞學、組織學和細菌學等方面都有極廣泛的應用。
草酸銨結晶紫染色液的使用方法:
1、準備好含有待測蛋白的固相膜:包括電泳、轉印、封阻、一抗(或生物素)處理、辣根過氧化酶(HRP)標記的二抗(或鏈霉親和素)處理、清洗等步驟。
2、加入適量的DAB顯色液,鋪滿整個固相膜表面(可按比例增減)。
3、置于平式搖蕩儀上,在室溫下孵育2至5分鐘,避免光照(暗室操作),直至棕褐色沉淀出現。
4、用鑷子夾起固相膜,放進無離子水里清洗。
5、空氣中晾干。
6、拍照記錄。
草酸銨結晶紫染色液的注意事項:
1、染色液應低溫密封保存。如有結晶析出,應確保結晶*溶解再行使用;
2、顯色工作液應現用現配,新鮮配制的工作液應為無色或淺棕色,如顏色過深,請勿使用;
3、DAB在常溫下不穩定,每次取用后均應及時加蓋密封放回冰箱,以免因草酸銨分解影響實驗,或因滲漏造成實驗環境污染;
4、草酸銨有潛在致突變作用,操作時應注意穿戴好防護用具。
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